索氏抽提法提取粗脂肪适用于脂类含量较高,结合态的脂类含量较少,能烘干磨细,不易吸湿结块的样品。
特点:操作简单,易提取,实验结果容易计算。
索氏抽提法,用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方法,如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是*的经典方法,也是我国粮油分折的标准方法。
实验原理
采用索氏抽提法中的残余法,即用低沸点有机溶剂(或石油醚)回流抽提,除去样品中的粗脂肪,以样品与残渣重量之差,计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外,还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质,因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。
实验材料
油料作物种子、中速滤纸
仪器装置
(1)索氏脂肪抽提器或JT-SXT-06型油分测定器
(2)干燥器(直径15~18cm,盛变色硅胶)
(3)不锈钢镊子(长20cm)
(4)培养皿
(5)分析天平(感量0.001g)
(6)称量瓶
(7)恒温水浴
(8)烘箱
(9)样品筛(60目)
试剂
或低沸点石油醚(A.R.)
实验步骤
(1)切片
将滤纸切成8cm×8cm,叠成一边不封口的纸包,用硬铅笔编写顺序号,按顺序排列在培养皿中。将盛有滤纸包的培养皿移入105±2℃烘箱中干燥2h,取出放入干燥器中,冷却至室温。按顺序将各滤纸包放人同一称量瓶中称重(记作a)、称量时室内相对湿度低于70%。
(2)包装干燥
在上述已称重的滤纸包中装入3g左右研细的样品,封好包口,放入105±2℃的烘箱中干燥3h,移至干燥器中冷却至室温。按顺序号依次放入称量瓶中称重(记作b)。
(3)抽提
将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中,注入一次虹吸量的1.67倍的A.R.使样品包浸没在A.R.中。连接好抽提器各部分,接通冷凝水水流,在恒温水浴中进行抽提,调节水温在70~80℃之间,使冷凝下滴的A.R.成连珠状(120~150滴/min或回流7次/h以上),抽提至抽取筒内的A.R.用滤纸点滴检查无油迹为止(约需6~12h)。抽提完毕后,用长镊子取出滤纸包,在通风处使A.R.挥发(抽提室温以12~25℃为宜)。提取瓶中的A.R.另行回收。
(4)称重
待A.R.挥发之后,将滤纸包置于105±2℃烘箱中干燥2h,放入干燥器冷却至恒重为止(记作c)。
计算结果
粗脂肪含量(%)=( b-c)/(b-a) ×100
式中:a:称量瓶加滤纸包重(g)
b:称量瓶加滤纸包和烘干样重(g)
c:称量瓶加滤纸包和抽提后烘干残渣重(g)